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产品介绍

赛恩宝生物提供 ChIP、RIP、Co-IP、MeRIP/m6A 免疫沉淀及 BioID / TurboID / APEX2 邻近标记技术服务,系统解析 DNA-蛋白、RNA-蛋白、蛋白-蛋白互作与 RNA 修饰,捕获活细胞内瞬时互作。

ChIP(染色质免疫共沉淀)DNA-蛋白互作 —— 研究转录因子结合位点与组蛋白修饰(qPCR / 测序下游)

服务简介

ChIP 通过特异性抗体富集与蛋白结合的 DNA 片段,研究转录因子结合位点、组蛋白修饰。支持天然 / 交联两种模式,下游可选 qPCR 或测序,助力表观调控与转录机制研究。

技术流程

交联(甲醛固定)→ 细胞裂解与染色质打断 → 抗体免疫沉淀 → 洗涤与解交联 → DNA 纯化 → qPCR / 测序分析

应用场景

  • 转录因子全基因组结合位点(ChIP-seq)
  • 组蛋白修饰图谱(H3K27ac、H3K4me3 等)
  • 启动子 / 增强子区域验证(ChIP-qPCR)
  • 可配套 ChIP 引物设计与合成服务
RIP(RNA 免疫沉淀)RNA-蛋白互作 —— 鉴定 RBP 靶标转录本(qPCR / 测序下游)

服务简介

RIP 捕获与 RNA 结合蛋白(RBP)互作的 RNA,鉴定靶标转录本。支持天然 / 交联模式,下游 qPCR 或测序,用于 RNA 加工、稳定性与翻译调控研究。

核心优势

  • 适用于 miRNA、lncRNA、mRNA、circRNA 等各类 RNA
  • 可配套 RIP 引物设计与合成
  • 支持 AGO2、HuR 等常见 RBP 抗体方案
  • 可与 MeRIP / m6A 联合绘制修饰图谱
Co-IP(免疫共沉淀)蛋白-蛋白互作 —— 验证已知或发现未知蛋白复合物(WB / 质谱鉴定)

服务简介

Co-IP 沉淀靶蛋白及其互作伙伴,验证已知或发现未知蛋白复合物,下游 WB 或质谱鉴定。是信号通路与蛋白复合物研究的基础手段。

技术要点

  • 抗体选择与对照设置(同型 IgG 阴性对照)
  • 裂解液配方优化,保持蛋白天然互作状态
  • 可结合质谱实现互作蛋白全景发现(Co-IP + MS)
  • 对膜蛋白 / 弱互作可选用邻近标记技术(BioID / TurboID / APEX2)替代
MeRIP / m6A(RNA 甲基化免疫沉淀)RNA 修饰研究 —— 富集 m6A 修饰 RNA,绘制全转录组修饰图谱(qPCR / 测序)

服务简介

MeRIP / m6A 借助 m6A 特异性抗体富集含修饰的 RNA 片段,绘制全转录组 m6A 修饰图谱,下游 qPCR 或测序,用于 RNA 修饰功能与表观转录组研究。

产品与方法

  • m6A 抗体富集 + qPCR 定量验证(单基因位点)
  • MeRIP-seq 全转录组 m6A 位点图谱
  • 可配套 m6A 引物设计与合成
  • 结合 RIP / RIME 解析 m6A 相关蛋白复合物
邻近标记(BioID / TurboID / APEX2)活细胞内瞬时 / 弱互作捕获 —— 融合标记酶原位标记邻近蛋白,无需稳定结合(质谱鉴定支持)

传统 Co-IP 等方法难以捕捉活细胞内瞬时或弱蛋白互作。邻近标记技术在目标蛋白上融合标记酶,原位标记邻近蛋白,无需稳定结合即可捕获瞬时互作。我们提供 BioID、TurboID、APEX2 三大主流系统技术服务。

BioID —— 温和稳定的经典方法

  • 原理:BirA* 突变体催化生成 Biotin-AMP,标记邻近蛋白赖氨酸残基(~10 nm)
  • 标记时间:18-24 小时
  • 核心优势:细胞毒性极低,适合活体动物实验,技术成熟
  • 适用场景:稳定复合物解析、亚细胞结构蛋白质组、活体长时程标记

TurboID —— 百倍提速的高效升级版

  • 原理:BioID 定向进化产物,标记赖氨酸残基(~10 nm)
  • 标记时间:10 分钟-1 小时
  • 核心优势:催化效率提升百倍,温度不敏感,适合植物 / 果蝇等非哺乳动物模型
  • 适用场景:信号通路动态激活、快速过程捕捉、活体组织特异性标记

APEX2 —— 秒级标记的“高速相机”

  • 原理:工程化过氧化物酶,自由基标记邻近蛋白酪氨酸残基(~20 nm)
  • 标记时间:30 秒-1 分钟
  • 核心优势:超高速标记,可精准时控,兼容电镜成像
  • 局限:H₂O₂ 有细胞毒性,操作门槛高
  • 适用场景:超快动态过程、培养细胞、线粒体 / 代谢通路研究
技术原理标记时间毒性核心优势首选场景
BioID连接酶,标记赖氨酸18-24 h无温和、活体适用稳定复合物、活体标记
TurboID连接酶(进化),标记赖氨酸10 min-1 h无快速、温度不敏感动态过程、植物研究
APEX2过氧化物酶,标记酪氨酸30 s-1 min有超快、可电镜成像超快事件、代谢通路

服务保障:专业方案设计 · 严格质控 · 质谱鉴定支持 · 全程技术支持。欢迎联系我们定制您的邻近标记研究方案。

IP 类技术快速选择

四种免疫沉淀技术的互作类型与下游检测对比:

技术互作类型核心用途下游检测
ChIPDNA-蛋白转录调控、组蛋白修饰qPCR / seq
RIPRNA-蛋白RBP 靶标、非编码 RNAqPCR / seq
Co-IP蛋白-蛋白复合物、信号通路WB / MS
MeRIPRNA 修饰m6A 图谱、修饰功能qPCR / seq
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